RBC Bioscience授权ViVaCell生产的HIT Competent Cells，无需热休克直接转化。HIT感受态细胞操作步骤简单，时间短，冻融稳定性好，并具高效转化率。
HIT-BL21(DE3)--BL21(DE3)感受态细胞
采用大肠杆菌BL21(DE3）菌株经特殊工艺制备得到的感受态细胞，用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测，转化效率可达107，-70℃保存6个月转化效率不发生改变。
基因型：F-, dcm, ompT, hsdS(rB-mB-), gal (DE3)
HIT-BL21(DE3) 不需要热刺激和恢复步骤。
BL21(DE3)感受态细胞转化效率：5ⅹ106~1ⅹ107 cfu/μg pUC19
BL21(DE3)感受态细胞应用：适用于T7、T7lac启动子的表达系统；适用于非毒性蛋白的表达。
HIT 感受态细胞优势：只需使用冰块！
与传统感受态细胞相比：
无需热刺激
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10min以内完成转化步骤
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真正1步/1管过程
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效率高达 108 cfu/ug 质粒
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增加冻融耐性
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简单的操作过程适合于自动化
操作步骤：
新一代感受态细胞，无需热刺激！
只需10mins简单操作，高效转化！
(1-10 minutes, efficiency=107 cfu/μg)
注意：转化前请准备好冰浴，将平板培养基与涂布玻璃珠干燥预热到37℃
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1) 从-70℃冰箱取出感受态细胞置于冰浴中10~20秒，至解冻1/3。
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2) 加入待转化的DNA(其中DNA 体积不应超过感受态细胞体积的1/10)。漩涡振荡离心管1秒，混匀内容物。
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3) 控制冰浴中静置1-10分钟（建议可以静置5分钟）。
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4) 转移至37℃干燥平板培养基(含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基等)上, 用ViVaCell涂布玻璃珠涂板。
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5)平板置于 37℃培养16-18 小时，观察转化克隆的增长
对于较大质粒(>6 kb)与cDNA库操作步骤：20min冰浴à1min42˚C水浴à 20min冰浴，将有助于提高转化效率。
参考文献
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a Identification and characterization of a novel enzyme related to the synthesis of PUFAs derived from Thraustochytrium aureum ATCC 34304
DH Kang, P Anbu, YS Jeong, BP Chaulagain… - Biotechnology and …, 2010 - Springer
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b Phenotypic and genetic characterization of Erwinia rhapontici isolated from diseased Asian pear fruit trees
SP Thapa, SY Cho, JH Hur, CK Lim - Phytoparasitica, 2012 - Springer
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c Development of SCAR marker for simultaneous identification of Miscanthus sacchariflorus, M. sinensis and M. x giganteus
JK Kim, GH An, SH Ahn, YH Moon, YL Cha… - Bioprocess and …, 2012 - Springer
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d Enhanced 2, 3-Butanediol Production in Recombinant Klebsiella pneumoniae via Overexpression of Synthesis-Related Genes
KB Rim, JH Park, MK Oh, JW Lee - Journal of Microbiology and …, 2012 - papersearch.net
